丙肝病毒的检查方法有哪些?

确定丙肝患者的病毒含量才能够更好的确认治疗方案和用药进度,所以选取适合自己的丙肝病毒检查是最重要的。ELISA是丙肝检测中常用的检测手段,但是ELISA其实并不是十分可靠的方法,容易造成许多假阳性,确诊要用RNA测定,造成这种现象的原因是什么呢?
1、抗原
检测抗HCV抗体的间接ELISA和CLIA试剂所用的抗原为基因工程法制备的融合蛋白,所包含的来自表达载体大肠埃希菌等的一些序列可与血清中抗大肠埃希菌的因子发生反应而产生假阳性结果;在合成肽制备过程中,如果某些肽序列错误,会导致合成肽特异性改变而产生假阳性;利用大肠埃希菌大规模表达后经破碎细胞、盐析、离子交换柱等分离纯化步骤得到的HCV重组抗原,如果纯度达不到100%,经过大肠埃希菌感染的血清可与抗原中杂蛋白产生反应而引起假阳性。
2、血清IgG浓度
人血清中IgG的浓度对间接ELISA抗HCV抗体检测效果有较大的影响,酶标的第二抗体能与人所有IgG结合,而IgG吸附于板孔的能力很强,虽然10ul反应血清采用100ul缓冲液稀释以降低本底,但在某些血清IgG水平偏高的受检者仍有可能出现弱阳性。
3、结缔组织病
结缔组织病如系统性红斑狼疮、MM等病症时,血清中的风湿小体和其他异常IgG(IgG浓度达到50mg/ML)会引起本底升高或假阳性。
4、溶血
溶血时释放到血清中的血红蛋白具有过氧化物酶的性质,当其通过吸附或“PP效应”(蛋白质间相互吸附的现象)相互结合后,可催化A、B液显色而造成假阳性。
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