尿液培养一般分为三步：尿液标本采集、定量培养和给出结果。其中，尿液标本采集是患者参与度最高的操作，需要格外注意，而剩余的两步需要由专业检验科人员进行操作。尿液标本采集方法需根据患者情况而定。

普通患者采集尿液标本步骤：
（1）挂号后领取无菌容器；
（2）容器上贴好标识条码，确认相关信息无误；
（3）确保会阴部清洁后，拉开阴唇或翻转包皮，进行不间断排尿，取样时将前段尿弃去，只留中段尿约10ml，即1/3杯存于无菌容器中；
（4）取样结束后拧紧盖子，立即将尿液样本送检，避免污染。
卧床患者采集尿液标本步骤：
（1）协助患者取卧位或半卧位；
（2）臀下置便盆，以免污染床单；
（3）配合医护人员进行外阴、尿道口清洁消毒；
（4）听从指令排尿，医护人员采集中段尿（＞10ml）；
（5）尿液采集完毕后整理衣物；
（6）医护人员盖紧试管盖子，贴上检验单附联，送检即可。
如果患者无法自行排尿，需通过导尿管采集尿液标本，具体步骤如下：
（1）患者取仰卧位，两腿屈膝，自然分开；
（2）医护人员在患者的臀下垫橡胶布和治疗巾；
（3）医护人员使用无菌水或苯扎溴铵消毒会阴部及尿道口，患者需配合操作；
（4）医护人员将无菌润滑油涂在导尿管前端；
（5）医护人员将尿管通过尿道插入患者膀胱，直至导尿管有尿液流出；
（6）尿液流出后，医护人员留取中段尿（＞10ml），以进行尿培养；
（7）如果排尿完毕不保留导尿管，可拔出导尿管，擦净外阴；如果需要保留导尿管，由医护人员进行留置导尿管的操作。
婴儿采集尿液标本步骤：
（1）家长或医护人员对其会阴部进行消毒；
（2）将无菌容器直接对准尿道口；
（3）排尿后，立即加盖送检。